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硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)

簡要描述:

硝酸還原酶(NR)測試盒廣泛存在于植物中,是植物硝態(tài)氮轉化為氨態(tài)氮的關鍵酶,也是誘導酶,對作物的產量和品質有影響。

更新時間:2024-09-02;廠商性質:經銷商;覽量:1566

商品屬性:

貨號

規(guī)格

檢測方法

YSH3491

100管/96樣

微量法

YSH3491-1

50管/48樣

紫外分光光度法


商品詳情:
硝酸還原酶(NR)測試盒(NADH速率法)測定意義

 

NR( EC 1.7.1.3)廣泛存在于植物中,是植物硝態(tài)氮轉化為氨態(tài)氮的關鍵酶,也是誘導酶,對作物的產量和品質有影響。

 

測定原理

 

NR催化硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;NADH在 340 nm 有最大吸收峰,通過測定NADH減少速率來表示NR活性。

 

需自備的儀器和用品

 

酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃保存。

試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃避光保存。臨用前加入667μL無水乙醇,蓋緊后充分混勻,再加入9.333 mL蒸餾水混勻,避光保存。

試劑四:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加1 mL蒸餾水,充分溶解。

標準品:粉劑×1瓶,臨用前加10 mL蒸餾水,充分溶解。1μmol/mL標準液,4℃避光保存。


測定操作:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min,調節(jié)波長到570 nm,蒸餾水調零。

2. 空白管:取EP管,加入10μL蒸餾水,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A空白管。顯色后務必在30min內測完。

3. 標準管:取EP管,加入10μL標準品,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A標準管。顯色后務必在30min內測完。

4. 測定管:取EP管,加入10μL上清液,100μL試劑二,100μL試劑三和10μL試劑四,混勻后蓋緊瓶蓋(防止水分散失),置于沸水浴中保溫15 min,冷卻后反復顛倒EP管數次,于570nm測定吸光值,記為A測定管。顯色后務必在30min內測完。

注意:空白管和標準管只需要測定一次。

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